ESTANDARIZACIÓN DEL CULTIVO DE LINFOCITOS PARA ANÁLISIS CITOGENÉTICO DE CARIOTIPO HUMANO EN UN LABORATORIO PRIVADO DE ENCARNACIÓN

Resumen

El cariotipo es el análisis cromosómico de un individuo. El estudio de cariotipos a partir de cultivos de linfocitos es crucial en genética clínica e investigación y se utiliza en el diagnóstico y seguimiento de enfermedades genéticas asociados a alteraciones cromosómicas numéricas o estructurales. Es preparado a partir de células vivas, para eso, es necesario realizar cultivo celular a partir de muestras de sangre periférica, médula ósea o líquido amniótico, siendo el método más común el cultivo de linfocitos a partir de sangre periférica. Actualmente, en el departamento de Itapúa, según registros de la base de datos del Centro de Información Científica del CONACYT (CICCO), no se cuenta con laboratorios que hayan implementado la técnica, por lo cual el objetivo fue estandarizar la técnica de cultivos de linfocitos a partir de sangre periférica, para el análisis citogenético de cariotipos humanos en un laboratorio privado de la Ciudad de Encarnación. Se realizó un estudio de tipo experimental, de corte transversal y con finalidad aplicada, en el área de Biología Molecular y Citogenética del Laboratorio privado RH Positivo, en Encarnación, Itapúa. El material biológico fue recolectado de 10 personas de forma voluntaria. Las muestras se sometieron por duplicado a dos ensayos; el primero, siguiendo las instrucciones del fabricante y el segundo, con modificaciones. Para el cultivo de linfocitos de sangre periférica se utilizó el medio para cariotipo PB-MAX™. La observación se realizó bajo un microscopio óptico, a 1000X con aceite de inmersión para comparar los resultados de ambos ensayos. En el primer ensayo se obtuvieron pocas células en metafase que se observaban muy cerradas al microscopio óptico, con presencia de un halo de citoplasma que impedía la fácil identificación de los cromosomas. Los cromosomas estaban muy cortos, lo que dificultaba la identificación de las bandas. Sin embargo, en el segundo ensayo se obtuvieron muchas células en metafase, bien abiertas, sin halo de citoplasma, lo que facilitaba la distinción una de otras. Se observaron cromosomas de longitud variada y de fácil identificación de bandas. Para la estandarización del cultivo (segundo ensayo), se obtuvieron metafases de calidad satisfactoria que presentaron cromosomas de buena longitud, bien extendidos y con bandeo nítido, lo que hizo posible observar y analizar el cariotipo de los voluntarios, identificando y agrupando a los cromosomas de acuerdo a su forma, tamaño, posición del centrómero y patrón de bandas. En conclusión, la técnica permite ofrecer la realización del análisis de cariotipo a la población de Itapúa y alrededores que presenten antecedentes de enfermedades genéticas y parejas con problemas de fertilidad, proporcionando información crucial para el asesoramiento genético y ayuda para la toma decisiones sobre las opciones de tratamiento.